抗人精子蛋白22单克隆抗体细胞株的建立与鉴定
王新刚1
宛传丹2
黄宇烽1
1.南京医科大学微生物与免疫学系,江苏,南京,2100292.常熟市第二人民医院检验科,江苏,常熟,215500
摘要:目的: 制备小鼠抗人精子蛋白SP22单克隆抗体并鉴定其特异性. 方法: 用BL/21菌表达的SP22作抗原免疫BALB/c小鼠,用有限稀释法筛选分泌SP22单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体,通过ELISA技术,Western印迹方法鉴定其敏感性及特异性.免疫组化法探讨SP22在人精子表面的分布与定位. 结果: 获得3株稳定分泌SP22单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其细胞培养液浓缩上清和混合腹水的效价分别为1∶ 1 000和1∶ 3 200,抗体亲和力为1.0×107L/mol,小鼠IgG亚类均为IgG1,Western印迹结果显示该抗体能特异性识别人精子SP22,免疫组化结果显示SP22主要定位于精子的顶体部位. 结论: 用杂交瘤技术制备的抗人SP22单克隆抗体具有高的效价和特异性,并且能特异地与人精子表面的SP22蛋白结合.
关键词:SP22单克隆抗体定位精子
分类号:R392(医学免疫学)R321.1(人体形态学)
论文发表日期:2006-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 303-307 )
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