重组蛋白Cox7a2原核表达及鉴定
陈亮1
辛钟成1
姜学军2
田龙1
袁亦铭1
刘刚1
宋卫东1
郭应禄1
1.北京大学第一医院男科中心,北京,1000092.中国科学院微生物研究所,北京,100080
摘要：目的:从原代培养的小鼠睾丸Leydig细胞中克隆Cox7a2基因,构建Pgex4t-1-Cox7a2载体,表达和鉴定重组蛋白.方法:应用RT-PCR方法从原代培养的小鼠睾丸Leydig细胞中克隆Cox7a2,利用BamH I和EcoR I酶切位点把Cox7a2克隆到pGEX4T-1载体,酶切和测序鉴定后,诱导重组蛋白的表达,进行纯化后,利用蛋白免疫印迹进行鉴定.结果:从原代培养的小鼠睾丸Leydig细胞克隆到Cox7a2完整的编码序列,构建了pGEX4T-1-Cox7a2载体,表达了预期相对分子质量的融合蛋白,并经免疫印迹检测鉴定.结论:成功克隆Cox7a2,表达纯化了其融合蛋白,为基因的功能研究奠定了前期基础.
关键词：Cox7a2线粒体pGEX4T-1重组睾丸小鼠
分类号：Q7(分子生物学)Q492.4(生殖生理学)
资助基金：国家工程"项目(219)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 794-797 )
英文信息