ATP50荧光表达载体构建及其在TM3小鼠睾丸Leydig细胞定位研究
陈亮1
辛钟成1
姜学军2
田龙1
袁亦铭1
刘刚1
宋卫东1
郭应禄1
1.北京大学第一医院男科中心,北京,1000092.中国科学院微生物研究所,北京,100080
摘要：目的:构建ATP50的荧光表达载体,研究其在原代培养的小鼠睾丸Leydig细胞中的表达和在TM3小鼠睾丸Leydig细胞中的定位.方法:原代培养小鼠睾丸Leydig细胞并利用3β-HSD染色法鉴定,应用PCR方法研究ATP50在小鼠睾丸Leydig细胞中的表达.利用Bam HI和Eco RI酶切位点把ATP50克隆到pEYFP-N1.细胞转染和细胞荧光显微镜技术观察YFP-ATP50在TM3小鼠睾丸Leydig细胞的定位.结果:ATP50表达在原代培养的小鼠睾丸Leydig细胞中.TM3小鼠睾丸Leydig细胞中,绿色荧光的YFP-ATP50和红色荧光的线粒体标记物Mitotracker有完全的共定位.结论:ATP50在小鼠睾丸Leydig细胞表达,成功构建了ATP50真核荧光蛋白表达载体,明确YFP-ATP50定位在Leydig细胞的线粒体.这些结果将对老年男性睾丸间质细胞睾酮合成功能障碍的研究提供重要的信息,有利于进一步深入研究.
关键词：ATP50荧光表达蛋白睾丸间质细胞线粒体小鼠
分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)Q492.4(生殖生理学)
资助基金：国家工程"项目(219)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 992-996 )
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