睾丸性不育动物模型的建立
刘风华1
杨冬梓2
王沂峰3
梁晓萍3
彭文明4
曹长安4
陈系古5
郭忠敏5
1.广州医学院第三附属医院,生殖中心,广东,广州,5101502.中山大学附属第二医院生殖中心,广东,广州,5101203.广州医学院第三附属医院,妇产科研究所,广东,广州,5101504.广州医学院第三附属医院,病理科,广东,广州,5101505.中山大学实验动物中心,广东,广州,510089
摘要：目的:探讨制作睾丸性不育动物模型的方法.方法:①X-射线局部照射:取8～10周龄的BALB/c雄鼠70只,分实验组1、2、3、4、5、6和对照组各10只.实验组1、2、3、4、5、6分别用1 000、1 200、1 400、1 600、1 800、2 000 cGy 6种不同的剂量照射睾丸局部 10 min;对照组不做任何处理.做受孕试验.②环磷酰胺腹腔注射:取4～5周龄的雄鼠40只,分实验组1、2、3和对照组各10只.实验组分别以30、50 70 mg/kg体重剂量的环磷酰胺腹腔注射,每周2次,连续注射5周;对照组腹腔注射生理盐水.做受孕试验.③达菲林腹腔注射:取8～10周龄的雄鼠20只,分实验组和对照组各10只.实验组腹腔注射0.375 mg/ml达菲林0.4 ml,对照组腹腔注射生理盐水0.4 ml.做受孕试验.④通过脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)、苏木精-伊红(HE)染色及免疫组化等病理学检查鉴定.未使雌鼠受孕的雄性小鼠定为睾丸性不育,共30只.结果:①X-射线局部照射:实验组1、2的雄鼠分别于X-射线照射后10、15 d使雌鼠受孕;实验组3、4的雄鼠,经观察3个月也未能使雌鼠受孕;实验组5、6的雄鼠,于X-射线照射后第5 d和第2 d死亡;对照组雄鼠皆于3 d内使雌鼠受孕.②环磷酰胺腹腔注射:实验组1 雄鼠体重增加7 g左右,停药后9～14 d恢复生育能力,使雌鼠受孕;实验组2 雄鼠体重增加4 g左右,停药后观察3个月未使雌鼠受孕;实验组3 雄鼠体重不增,呈消瘦状,分别于用药第3、4、5周相继死亡;对照组雄鼠皆于3 d内使雌鼠受孕.③达菲林腹腔注射:实验组雄鼠于停药后3周左右使雌鼠受孕;对照组雄鼠皆于3 d内使雌鼠受孕.④TUNEL结果:对照组睾丸组织偶见凋亡细胞,占(0.71±0.12)%;睾丸性不育组睾丸组织凋亡细胞数量明显增加,占(10.36±1.48)%,两者比较差异有显著性(P＜0.05).HE染色:对照组睾丸组织正常,生精小管呈饱满椭圆形,各级生精细胞排列有序,内含大量精子细胞;睾丸性不育组生精小管萎缩,细胞排列疏松,未见各级生精细胞,只有支持细胞,各生精小管间腔隙扩大,间质细胞减少.免疫组化染色:CD29、Hsp90α、CD117的阳性表达率对照组分别为(50.3±5.2)%、(41.6±3.5)%、(73.6±3.7)%,而睾丸性不育组明显降低,分别为(1.3±0.2)%、0%、(1.6±0.3)%(P＜0.01).p53阳性表达率对照组为(19.7±0.8)%,而睾丸性不育组明显增高,为(39.4±2.9)%(P＜0.01).结论:X-射线睾丸局部照射、环磷酰胺腹腔注射法均可制作睾丸性不育动物模型.
关键词：睾丸不育动物模型
分类号：R169.43(生殖健康与卫生)R-332(实验医学、医学实验)
资助基金：广东省自然科学基金(021853)教育部留学回国人员科研启动基金(D002003001)高等学校博士学科点专项科研基金(200220558078)国家科技攻关计划(2002Z3-E0161)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 125-129 )
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