小干扰RNA抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞间隙连接蛋白connexin43的表达
曹正国1
诸禹平1
孙友文1
董晓程1
亓林1
肖峻1
陈昊1
任维华2
邹练3
1.安徽医科大学附属省立医院,泌尿外科,安徽,合肥,2300012.安徽医科大学附属省立医院,中心实验室,安徽,合肥,2300013.中国人民解放军第二炮兵总医院泌尿外科,北京,100088
摘要：目的:利用小干扰RNA(siRNA)抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞间隙连接蛋白connexin43(Cx43)的表达和检测细胞间间隙连接通讯功能,探讨该技术在阴茎海绵体平滑肌细胞间隙连接和阴茎勃起功能研究中的应用.方法:利用Ambion公司设计软件,构建靶向人Cx43基因的siRNA重组质粒,转染人阴茎海绵体平滑肌细胞48 h后,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测Cx43基因和蛋白的相对表达水平、划痕标记荧光染料传输技术检测细胞间间隙通讯功能,并分别与siRNA阴性对照、空白对照组比较.结果:酶切和测序证实siRNA真核表达载体构建成功.siRNA重组质粒转染细胞后的Cx43 mRNA和蛋白相对表达水平分别为(0.45±0.08)%、(0.56±0.06)%,与siRNA阴性对照组(0.72±0.04)%、(0.80±0.08)%和空白对照组(0.74±0.09)%、(0.77±0.11)%相比,差异均有显著性(P＜0.05);转染后的细胞间间隙连接通讯功能也显著降低.结论:siRNA能有效抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞Cx43的表达和阻断间隙连接介导的间隙连接通讯功能.
关键词：阴茎海绵体平滑肌细胞间隙连接连接蛋白细胞间通讯人
分类号：R789(口腔科学)R322.6+4(人体形态学)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 440-443 )
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