大鼠脂肪组织来源干细胞的分离、培养和生物学特性的研究
邓春华
孙祥宙
高勇
罗道升
刘贵华
黄燕平
1.中山大学附属第一医院泌尿外科,广东,广州,5100802.中山大学附属第一医院泌尿外科,广东,广州,5100803.中山大学附属第一医院泌尿外科,广东,广州,5100804.中山大学附属第一医院泌尿外科,广东,广州,5100805.中山大学附属第一医院泌尿外科,广东,广州,5100806.中山大学附属第一医院泌尿外科,广东,广州,510080
摘要：目的:建立一种分离和培养大鼠脂肪干细胞的方法,并探讨获得的脂肪干细胞的部分生物学特性.方法:取SD大鼠腹股沟处的皮下脂肪,I型胶原酶消化法获取原代脂肪干细胞,接种至含10%胎牛血清的DMEM培养液,培养并适时传代,每日在倒置显微镜下观察记录细胞形态和增殖特征,测定其生长曲线,进行冻存复苏实验.第3代细胞使用成骨诱导液诱导其向成骨细胞分化,进行Von Kossa染色;使用成脂诱导液诱导其向成脂细胞分化,进行油红O染色.结果:从大鼠脂肪组织中分离出脂肪干细胞,其在体外生长增殖迅速,呈成纤维样细胞生长.生长曲线表明第3代脂肪干细胞增殖能力最强,可以在地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠的诱导下,表现出成骨细胞特性,Von Kossa染色出现矿化结节;在.IBMX(3-异丁基-1-甲基黄嘌呤)、吲哚美辛、胰岛素的诱导下,表现出脂肪细胞特性,油红O染色后发现胞浆内有脂肪滴.脂肪干细胞在液氮中冻存1个月后,其生长增殖活性和多向分化能力没有明显降低.结论:成功建立了一种简单有效的分离和培养大鼠脂肪干细胞的方法,获得的脂肪干细胞生长增殖旺盛,具有多向分化能力,可以方便地保存,有望作为细胞治疗和组织工程的种子细胞.在分离大鼠的脂肪干细胞时,NH4Cl裂解红细胞这一步可以省略,地塞米松在成脂诱导过程中不是必需的.
关键词：脂肪干细胞大鼠成骨诱导成脂诱导
分类号：Q813.1(细胞工程)Q254(细胞生理学)
资助基金：广东省自然科学基金(07001628)广东省科技计划(2003C34008)广东省卫生厅项目(B2004034)
论文发表日期：2008-01-31
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 99-105 )
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