小鼠精原干细胞体外培养体系的建立
孙源
陶科
涂炯炯
朱文兵
范立青
1.中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南,长沙,4100782.中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南,长沙,4100783.中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南,长沙,4100784.中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南,长沙,4100785.中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南,长沙,410078
摘要：目的:建立小鼠精原干细胞体外扩增的培养体系. 方法:取出生后2～6 d的雄性ICR小鼠30只,脱颈法处死,切取睾丸后,采用两步酶消化法制成单细胞悬液,添加特定培养液,以小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层细胞进行体外培养.培养后通过BrdU整合实验检测其增殖能力,并用碱性磷酸酶(AP)染色、免疫荧光及RT-PCR技术对培养细胞进行鉴定. 结果:小鼠精原干细胞在体外稳定增殖,所得克隆AP强阳性,标记物检测GFRa-1+/Oct-4+/VASA+/SCP3-,基因表达GFRa-1+/Oct-4+/SCP3-,证实所培养细胞为处于未分化状态的小鼠精原干细胞. 结论:在本研究建立的培养体系下小鼠精原干细胞可稳定传代并保持未分化状态,为探索体外精子发生过程提供了良好的研究平台.
关键词：精原干细胞睾丸细胞培养体外小鼠
分类号：R321.1(人体形态学)
资助基金：国家自然科学基金(30470884)
论文发表日期：2008-07-31
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 695-700 )
英文信息