一种新型的具有免疫调节和介导DNA基因治疗的蛋白质载体的研制
商学军1
葛京平2
黄卫东3
姚根宏4
李宏军3
黄宇烽1
1.南京大学医学院临床学院/南京军区南京总医院,男科,江苏南京,2100022.南京大学医学院临床学院/南京军区南京总医院,泌尿外科,江苏南京,2100023.重庆佳音前列腺疾病科研所,重庆,4000234.南京大学医学院临床学院/南京军区南京总医院,输血科,江苏南京,210002
摘要：目的:研制一种具有调节宿主免疫系统,同时又能包装核酸进入肿瘤细胞的新型蛋白质载. 方法:利用基因工程技术,将人乙肝病毒核心抗原(HBcAg)的-COOH端和靶向肿瘤的整和素配体RGD肽与谷胱甘肽还原酶(GST)在大肠埃希菌中融合表达,经分子筛和GST亲和纯化后,获得DNA包装蛋白GST-RGD-ΔHBcAg.此包装蛋白用FITC标记后与前列腺癌PC-3细胞孵育,观察进入细胞情况;并用此包装蛋白包装含绿色荧光蛋白GFP基凶的DNA载体pEGFP-N1,转染PC-3细胞,观察绿色荧光蛋白表达.此外,用包装蛋白GST-RGD-ΔHBcAg免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,检测m清IgG1和IgG2a抗体水平. 结果:本研究应用原核表达系统成功地表达并纯化出DNA包装蛋白GST-RGD-AHBcAg;荧光显微镜下观察到包装蛋白GST-RGD-AHBcAg能进入到PC-3细胞,并能携带绿色荧光蛋白基凶进入PC-3细胞并表达;该包装蛋白免疫BALB/c小鼠后,小鼠血清IgG1和IgG2a抗体水平同时升高. 结论:本研究研制的DNA包装蛋白GST-RGD-ABcAg可作为基因治疗载体,并能对宿主的免疫系统起调节作用,为肿瘤的免疫--基因治疗载体提供一个新的选择.
关键词：非病毒载体RGD肽乙肝病毒核心抗原谷胱甘肽还原酶
分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)
论文发表日期：2008-09-30
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 888-892 )
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