短发夹状RNA抑制缺氧诱导因子1α在前列腺癌细胞中的表达
平浩1
邢念增1
陈晓春2
张军晖1
闫勇1
杨勇1
1.首都医科大学附属北京朝阳医院泌尿外科,北京,1000202.华中科技大学同济医学院附属协和医院泌尿外科,湖北,武汉,430022
摘要：目的:构建产生缺氧诱导因子1α(HIF-1α)特异性短发夹状RNA(shRNA)的载体并检测其抑制作用,探讨该技术在前列腺癌治疗中的应用前景.方法:设计、合成针对HIF-1α的特异性shRNA模板序列,将其插入含有U6启动子的psilencerTM2.1-U6载体中,得到shRNA表达载体psilencer-HIF,在脂质体介导下转染前列腺癌细胞株PC-3M,应用绿色荧光蛋白质粒pEGFP共转染评价转染效率,RT-PCR及Western印迹检测其对HIF-1α表达的影响.结果:重组质粒psilencer-HIF经测序分析证实与设计的完全一致,共转染24 h后质粒转染效率为(89.26±4.72)%,其产生的shRNA在PC-3M细胞中能诱导RNA干扰(RNAi),转染后48 h HIF-1α mRNA和蛋白水平分别下降82.09%和81.61%(P＜0.01);而阴性对照组HIF-1α表达水平无明显改变(P＞0.05).结论:成功构建了HIF-1α基因shRNA表达质粒,其可有效抑制前列腺癌细胞中的HIF-1α的表达,为前列腺癌的基凶治疗提供了新思路.
关键词：RNA干扰短发夹状RNA缺氧诱导因子1α前列腺癌
分类号：R737.25(泌尿生殖器肿瘤)
论文发表日期：2008-10-31
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 993-997 )
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