人胚胎成纤维细胞饲养层支持人精原干细胞的生长
王毓斌1
陈斌1
王颖超2
张志玲3
王鸿祥1
卢永宁1
向祖琼1
胡凯1
杨怡珂3
韩银发1
汪铮2
王益鑫1
黄翼然1
1.上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿外科,上海市男科学研究所上海,2000012.上海交通大学医学院附属仁济医院,上海市消化疾病研究所干细胞实验室,上海,2000013.上海交通大学医学院附属仁济医院,妇产科,上海,200001
摘要:目的:探讨人精原干细胞分离、纯化及以人胚胎成纤维细胞为饲养层培养的方法和条件. 方法:利用两步酶法和Pereoll不连续密度离心法分离、纯化人精原干细胞,在人胚胎成纤维细胞饲养层上培养;用免疫组织化学方法检测精原干细胞表面标志SSEA-1和OCT4;检测精原干细胞克隆碱性磷酸酶活性;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测精原干细胞相关基冈的表达. 结果:精原干细胞在人胚胎成纤维细胞饲养层上可以存活并增殖形成集落.集落未分化标志检测显示SSEA-1、OCT4呈阳性,碱性磷酸酶活性呈强阳性,并表达精原干细胞相关基因.结论:人胚胎成纤维细胞饲养层可以支持人精原干细胞的生长.
关键词:精原干细胞人胚胎成纤维细胞饲养层分离纯化细胞培养人
分类号:R321.1(人体形态学)
资助基金:上海市项目(2007JG06)
论文发表日期:2008-11-30
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 1063-1068 )
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