Ⅱ型单纯疱疹病毒培养及gG-2基因特异片段的克隆
高建1
黄宇烽2
曹晶3
王浩洋2
陆金春4
1.南京师范大学生命科学学院,江苏,南京,210046;南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所,江苏,南京,2100022.南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所,江苏,南京,2100023.南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所,江苏,南京,210002;南京医科大学基础医学院微生物与免疫学系,江苏,南京,2100294.南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所,江苏,南京,210002;武警江苏总队医院南京分院检验科,江苏,南京,210028
摘要：目的:通过培养和扩增Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)并提取其全基因组,从而克隆包膜糖蛋白gG-2全长基因及其保守性较高、抗原性较强的特异片段. 方法:将HSV-2病毒感染Hela细胞获得大量病毒液,用酚-氯仿法提取病毒全长基因组,并以此为模板扩增编码gG-2的US4基因,再根据氨基酸序列比对结果,选取其特异片段,设计带酶切位点的引物克隆gG-2基因特异片段. 结果:成功地获得了大量HSV-2病毒液并提取了病毒基因组,克隆了gG-2全长基因以及特异片段,测序证实,两者均与GenBank中报道的序列相一致. 结论:对于遗传特性相对稳定的HSV-2来说,通过病毒感染细胞的方法短时期内获得大量病毒液,并从病毒全基因组中克隆gG-2特异基因片段的方法是可行的,从而为进一步构建gG-2特异片段相关载体、表达相应蛋白奠定了基础.
关键词：Ⅱ型单纯疱疹病毒gG-2病毒感染
分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：中国博士后科学基金(20080441334)
论文发表日期：2009-03-08
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 223-227 )
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