不同基质蛋白对小鼠胚胎干细胞生殖细胞分化相关基因表达的影响
郭新
漆正宇
秦洁
崔光辉
桂耀庭
蔡志明
1.北京大学深圳医院,广东省男性生殖和遗传重点实验室,广东,深圳,5180362.北京大学深圳医院,广东省男性生殖和遗传重点实验室,广东,深圳,5180363.北京大学深圳医院,广东省男性生殖和遗传重点实验室,广东,深圳,5180364.北京大学深圳医院,广东省男性生殖和遗传重点实验室,广东,深圳,5180365.北京大学深圳医院,广东省男性生殖和遗传重点实验室,广东,深圳,5180366.北京大学深圳医院,广东省男性生殖和遗传重点实验室,广东,深圳,518036
摘要:目的:探讨不同基质蛋白对小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)分化形成拟胚体(embryoid bodies,EBs)后生殖细胞分化相关基因表达的影响及机制. 方法:mESCs分化形成EBs 3 d后接种于不同基质蛋白包被的培养皿中,包括人工基底膜(matrigel,M组)、纤维连接蛋白(fibronectin,F组)、层粘蛋白(1aminin,L组)、胶原(collagen,C组)和非生物活性底物琼脂糖(agarose,A组),同时设不加任何基质蛋白的空白对照组(B组).RT-PCR检测EBs在不同基质蛋白上d1~d4期间生殖细胞分化相关基因的表达,以及mESCs内源性基质蛋白FN(fibronectin)、LN(laminin)以及整合素受体β1基因的表达. 结果:L组和F组EBs易贴壁分化,RT-PCR结果也证实原始生殖细胞(PGCs)分化基因Blimp-1、Stella、Mvh和减数分裂启动基因Stra8在L组和F组表达总体趋势为逐渐增强;M组和C组的表达趋势不明显;A组基因表达水平整体偏低;空白对照B组基因表达水平整体偏高但均呈下降趋势.L组和空白对照组细胞表达内源性基质蛋白FN、LN以及整合素受体β1. 结论:层粘蛋白/β1信号途径可能对mESCs向PGCs分化具有指导作用,外源性层粘蛋白可能通过其受体β1亚单位传递诱导信号,调节mESCs来源的EBs向PGCs分化,FN可能通过其他整合素受体亚单位发挥作用.无任何外源性基质蛋白时,自身分泌的内源性基质蛋白也促进细胞分化.
关键词:基质蛋白小鼠胚胎干细胞拟胚体原始生殖细胞生殖细胞分化相关基因
分类号:R321.1(人体形态学)
资助基金:国家自然科学基金(30500543)深圳市科技局项目(985-2-054-29;JH200505270413B)广东省自然科学基金(7300931)广东省医学科学技术研究项目(B2009230;B2007158)
论文发表日期:2009-10-26
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 967-973 )
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中华男科学杂志

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CSTPCD北大核心CSCD
ISSN:1009-3591
年,卷(期):2009,15(11)
所属栏目:论著