靶向前列腺癌并携带SATB1基因shRNA溶瘤腺病毒的构建
毛立军
郑骏年
李望
王军起
陈家存
孙晓青
1.徐州医学院附属医院泌尿外科,江苏,徐州,2210022.徐州医学院附属医院泌尿外科,江苏,徐州,2210023.徐州医学院附属医院泌尿外科,江苏,徐州,2210024.徐州医学院附属医院泌尿外科,江苏,徐州,2210025.徐州医学院附属医院泌尿外科,江苏,徐州,2210026.徐州医学院附属医院泌尿外科,江苏,徐州,221002
摘要：目的:构建DD3启动子调控并携带SATBl基因shRNA溶瘤腺病毒,研究其对前列腺癌的特异抗肿瘤作用. 方法:以pSilencer3.1-SATB1为模板,通过PCR扩增出SATB1-shRNA表达框并克隆至pZD55载体,构建重组质粒pZD55-SATB1-shRNA.EcoRV和Xba Ⅰ分别酶切pZD55-SATB1-shRNA和pZXC2-DD3-E1A,将目的片段连接重组,获得质粒pDD3-ZD55-SATB1,将其与腺病毒包装质粒pBHGE3共转染293细胞.PCR鉴定正确者即为溶瘤腺病毒DD3-ZD55-SATB1.扩增,纯化,测病毒滴度.结晶紫染色观察对前列腺癌细胞毒性;Western印迹检测ElA在列腺癌细胞中的表达;RT-PCR和Western印迹检测列腺癌细胞中SATB1基因沉默效果. 结果:成功构建DD3启动子调控同时携带SATB1-shRNA的溶瘤腺病毒DD3-ZD55-SATB1,初步证实DD3-ZD55-SATB1复制具有高度的前列腺癌靶向性和特异的SATB1基因沉默效果. 结论:成功构建的溶瘤腺病毒DD3-ZD55-SATB1为进一步体内外研究其对前列腺癌的治疗作用奠定基础.
关键词：DD3启动子SATB1基因RNA干扰溶瘤腺病毒前列腺癌
分类号：R73-3(肿瘤学实验研究)
资助基金：国家自然科学基金(3070099)江苏省自然科学基金(BK2008122)
论文发表日期：2010-08-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
英文信息