尿道下裂仔鼠阴茎蛋白质组学分析及膜联蛋白A3的表达变化研究
常俊锴1
张炜1
沈百欣2
魏云飞1
张力峰1
王勇1
冯宁翰1
1.南京医科大学第一附属医院泌尿外科,江苏,南京,2100292.南京医科大学第二附属医院泌尿外科,江苏,南京,210011
摘要:目的:探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)胚胎期暴露对仔鼠阴茎组织蛋白表达谱的影响,分离并鉴定差异表达蛋白质.验证膜联蛋白A3在仔鼠阴茎中的表达变化,初步探讨其在尿道下裂发生中的作用. 方法:SPF级SD孕鼠20只,妊娠14~18 d(GD14~GD18),随机均分为2组,实验组给予DBP按800 mg/kg染毒孕鼠,对照组按大豆油5 ml/kg,2组孕鼠均每天灌胃1次连续5 d.出生后3 d取出实验组尿道下裂雄性仔鼠阴茎和对照组正常雄性仔鼠阴茎,提取总蛋白,进行二维凝胶电泳分离和图像分析,筛选出的差异蛋白质点利用质谱技术进行鉴定,并运用Western印迹和免疫组化法分析膜联蛋白A3在仔鼠阴茎中的表达变化. 结果:共筛选出31个差异表达蛋白,其中17个通过质谱分析和SwissProt蛋白数据库检索得到鉴定,包括丙酮酸激酶M2、α烯醇化酶、膜联蛋白A3等.膜联蛋白A3相对表达量在尿道下裂组为1.851±0.014(n=10),正常对照组为2.603±0.012(n=10),两组的差异具有显著性(P<0.05).膜联蛋白A3主要定位于仔鼠尿道上皮细胞. 结论:运用蛋白质组学方法,建立了DBP孕期暴露致尿道下裂雄性仔鼠与正常仔鼠阴茎蛋白质差异表达谱系.膜联蛋白A3的表达变化可能在尿道下裂尿道沟融合障碍过程中发挥重要作用.
关键词:邻苯二甲酸二丁酯尿道下裂蛋白质组学膜联蛋白A3
分类号:R321.6(人体形态学)R339.3+5(人体生理学)R697+.11(泌尿科学(泌尿生殖系疾病))
资助基金:国家自然科学基金(30872596)
论文发表日期:2010-10-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
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