大鼠睾丸Leydig细胞体外增殖研究
毕宏达1
王晓云1
周广东2
刘伟2
李鸣1
邢新1
1.第二军医大学长海医院整形外科,上海,2004332.上海交通大学第九人民医院组织工程重点实验室,上海,200011
摘要：目的:探讨通过优化细胞培养体系,实现Leydig细胞的体外增殖培养.方法:联合应用胶原酶消化、不锈钢滤网过滤及差速贴壁法获得3周龄雄性Wistar大鼠睾丸Leydig细胞,贴壁细胞以DMEM/F12培养液及优化培养体系培养,MTT法、细胞计数法检测培养细胞的增殖能力;分别对原代培养2 h、4 d细胞进行3β-HSD免疫化学染色及流式细胞术分析,检测细胞成分,同时检测培养细胞睾酮在hCG刺激下分泌能力变化.结果:优化培养体系能够明显促进3周龄大鼠睾丸Leydig细胞大量增殖,群体倍增时间为(2.26±0.31)d,传统培养体系培养细胞群体倍增时间为(16.32±2.14)d,两者差异有显著性(P<0.05);原代细胞经流式细胞术鉴定,3β-HSD阳性细胞所占比例分别为(54.3±7.1)%,培养4 d后,增殖细胞3B-HSD阳性细胞率为(93.6±4.6)%.增殖细胞均有睾酮生成功能,在hCG刺激下睾酮分泌均明显上升(P<0.05).结论:优化培养体系能够促进差速贴壁法获得的睾丸Leydig细胞大量增殖.
关键词：Leydig细胞睾酮增殖3β-羟基类固醇脱氢酶组织工程
分类号：Q813.1+1(细胞工程)
资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）(2005CB52270524)国家自然科学基金(30600619)
论文发表日期：2011-01-31
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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