应用酵母双杂交系统筛选小鼠PIAS2相互作用蛋白
郑英1
贾筱琴2
张露萍1
王海燕1
胡艳秋3
1.扬州大学医学院 组织学与胚胎学教研室2.扬州大学医学院 病理学教研室,江苏扬州,2250013.扬州大学医学院 扬州大学附属医院生殖医学中心,江苏扬州,225001
摘要：目的:应用酵母双杂交技术,从小鼠精原细胞cDNA文库中筛选与PIAS2( protein inhibitor of activated STAT 2,PIAS2)相互作用的未知蛋白.通过对其相互作用蛋白的筛选和研究,探讨PIAS2在精子发生中的作用机制,为临床男性不育症的治疗和诊断提供理论基础. 方法:以pGBKT7 -PIAS2为诱饵质粒,从小鼠精原细胞cDNA文库中筛选出与pGBKT7-PIAS2相互作用的阳性克隆,对验证后的阳性克隆进行测序及生物信息学分析,进一步采用直接酵母双杂交进行相互作用的验证. 结果:经过筛选、测序、同源性分析及直接酵母双杂交验证,发现了与PIAS2相互作用的8个候选蛋白:Cyfip2、Psmb3、Nme1、mscharin、Nsun5、Ints10、Gnb211及Ndufaf3. 结论:应用酵母双杂交系统,共筛选得到了8个不同的基因,其编码蛋白与PIAS2相互作用,可能与男性生殖调控相关.对上述蛋白与PIAS2的相互作用研究有助于揭示PIAS2的作用机制.
关键词：酵母双杂交PIAS2精子发生蛋白质相互作用小鼠
分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(31071020)江苏省自然科学基金(BK2009192)江苏省研究生创新项目(CXZ211-0996)
论文发表日期：2011-09-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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