体外诱导人脂肪干细胞向Leydig细胞定向分化的研究
王玉芸1
曾莉1
李凯2
张洁2
林苹2
黄鲁刚1
1.四川大学华西医院小儿外科,四川成都,6100412.四川大学华西医院老年医学研究室,四川成都,610041
摘要:目的:探讨体外诱导脂肪干细胞(ADSCs)向Leydig细胞分化的可能性和条件. 方法:应用Ⅰ型胶原酶消化法分离人皮下脂肪组织中ADSCs,原代培养,适时传代.免疫组化方法检测波形蛋白的表达.以人绒毛膜促性腺激素(hCG)不同浓度及不同作用时间进行诱导后,实时荧光PCR检测类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)基因的表达.MTT法测定hCG诱导下的细胞增殖情况.在hCG、DMSO诱导1周后行3β-HSD免疫组化染色,并采用放射免疫法检测其培养上清及细胞裂解液的睾酮水平. 结果:ADSCs增殖迅速,ADSCs波形蛋白呈黄褐色阳性表达;ADSCs中StAR基因的表达在一定范围内与hCG诱导浓度的增加成正相关,hCG 10 U/ml达到高峰,该浓度诱导1周内StAR表达随时间延长而增加;hCG诱导增加ADSCs细胞增殖;hCG 10 U/ml、DMS0 3.2×10-6mol/L条件下诱导1周后细胞中3β-HSD免疫组化染色可见胞质呈浅褐色弱阳性,且该条件下细胞裂解液睾酮测定值明显高于其它组. 结论:①hCG在一定范围内促进ADSCs的StAR基因表达;②hCG可以促进ADSCs增殖;③在hCG 10 U/ml、DMS0 3.2×10 -6mol/L诱导下,人ADSCs有向Leydig细胞分化的可能.
关键词:脂肪干细胞Leydig细胞人绒毛膜促性腺激素类固醇激素合成急性调节蛋白
分类号:Q813.5(细胞工程)
资助基金:四川省科技计划(2009Jy0037)
论文发表日期:2012-11-20
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
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中华男科学杂志

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ISSN:1009-3591
年,卷(期):2012,18(9)
所属栏目:论著