精子碱性单细胞凝胶电泳法优化条件的建立及效果分析
邓爽1
范烺1
伍细言2
朱燕1
徐克前1
1.中南大学湘雅医学院医学检验系,湖南长沙,4100132.湖南省妇幼保健院生殖中心,湖南长沙,410008
摘要：目的:探讨精子碱性单细胞凝胶电泳法(SCGE)的主要影响因素,并优化条件,以利于标准化. 方法:采用不同浓度H2O2处理精子,碱性SCGE检测精子DNA碎片(SDF),探讨凝胶层数、DNA解旋及电泳时的pH、DNA解旋及电泳时间、计数精子数对结果的影响,分析优化后方法的重复性,并用于检测40例精液标本. 结果:3层琼脂糖凝胶可降低本底,DNA解旋及电泳缓冲液最佳pH值为10,最佳DNA解旋及电泳时间分别为40 min和30 min,计数50个精子即可保证结果的可靠性.优化后的碱性SCGE,用尾部DNA含量百分比表示,其批内、批间变异系数(CV)分别为3.12％、7.13％,用DNA损伤得分表示,其批内、批间CV分别为2.38％和6.09％.与健康生育男性相比,少弱畸形精子症不育男性精液SDF显著升高(P＜0.05). 结论:优化后的精子碱性SCGE,重复性好,易于标准化,可用于不育男性SDF检测,适合在临床推广应用.
关键词：精子DNA损伤精子DNA碎片碱性单细胞凝胶电泳
分类号：R698+.2(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)
论文发表日期：2015-01-31
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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