前列腺癌恩杂鲁胺耐药细胞株的建立及相关lncRNA和mRNA的筛选
关翰1
凌志新2
方芳3
毛溧凯4
尤宗昊2
王灿2
陈恕求5
许斌5
陈明5
1.蚌埠医学院第一附属医院泌尿外科,安徽蚌埠,2330002.东南大学医学院研究生院,江苏南京,2100093.蚌埠医学院免疫学教研室,安徽蚌埠,2330004.蚌埠医学院研究生院,安徽蚌埠,2330005.东南大学附属中大医院泌尿外科,江苏南京,210009
摘要：目的:构建人前列腺癌恩杂鲁胺耐药细胞株并筛选恩杂鲁胺耐药对lncRNA和mRNA表达谱的影响. 方法:体外以恩杂鲁胺10 μmol/L浓度诱导培养人前列腺癌LNCaP及C4-2B细胞株6个月,建立耐药细胞株LNCaP-ENZA及C4-2B-ENZA.MTT法检测各细胞株IC50值和耐药指数,Western印迹检测前列腺癌恩杂鲁胺耐药相关基因FL-AR、AR-V7、HnRNPA1在各细胞株中的表达.应用高通量芯片技术筛选C4-2B和C4-2B-ENZA细胞中差异表达的lncRNA与mRNA. 结果:恩杂鲁胺耐药细胞株LNCaP-ENZA和C4-2B-ENZA的ICS0值分别为60.83、88.32 μmol/L,与亲本细胞(分别为12.31、18.96 μmol/L)相比显著增高(P＜0.05),其耐药指数分别为4.94和4.67.Western印迹结果表明LNCaP-ENZA和C4-2B-ENZA中恩杂鲁胺耐药相关基因AR-V7、HnRNPA1的蛋白表达量相较与LNCaP和C4-2B细胞显著升高,而FL-AR的表达量未见显著改变.通过lncRNA芯片技术筛选后发现与C4-2B相比,在C4-2B-ENZA细胞中显著差异表达的lncRNA有1 440个,其中上调倍数最大者为DPP10-AS1(fold change=33.6),下调最大倍数为G090385(fold change=186.41);mRNA有1236个,其中上调倍数最大者为BCHE(fold change=193.70),下调倍数最大者为ANKRD1(fold change=182.90). 结论:成功建立了人前列腺癌恩杂鲁胺耐药细胞,并且筛选出了与耐药相关的lncRNA与mRNA,为前列腺癌恩杂鲁胺耐药的治疗提供分子依据.
关键词：前列腺癌恩杂鲁胺耐药LNCaP细胞株C4-2B细胞株lncRNAmRNA
分类号：R737.25(泌尿生殖器肿瘤)
论文发表日期：2018-01-31
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 116-121 )
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