SPAG6/SPINK2蛋白复合物在小鼠精子顶体形成中的作用初探
张宏伟1
张玲1
陈雅梦1
申鑫1
王恒琦1
柳赟昊1
张志兵2
1.武汉科技大学医学院公共卫生学院环境卫生与职业医学系职业危害识别与控制湖北省重点实验室,湖北武汉4300652.武汉科技大学医学院公共卫生学院环境卫生与职业医学系职业危害识别与控制湖北省重点实验室,湖北武汉430065;Department of Obstetrics and Gynecology,Wayne State University, Detroit, MI 48201, USA
摘要:目的:初步探讨精子相关抗原6(SPAG6)在小鼠精子发生过程中顶体形成阶段的表达及其调控作用. 方法:采用Western印迹检测出生后小鼠睾丸发育不同阶段(第8、12、16、20、24、28、30、35天)中SPAG6的表达;免疫荧光观察SPAG6在生精细胞中的定位;分别构建SPAG6和SPINK2蛋白表达质粒,以AH109和CHO细胞为对象,采用酵母双杂交及细胞内共定位实验检测SPAG6与SPINK2蛋白间相互作用;免疫荧光检测SPINK2在SPAG6基因敲除(KO)小鼠的睾丸生精细胞中的表达与定位. 结果:小鼠出生后第16~28天,SPAG6表达显著升高,且定位于圆形精子细胞的顶体;酵母双杂交实验显示SPAG6/SPINK2组能在选择性培养基(SD/-Leu/-Trp/-His)中生长;CHO细胞共转染SPAG6和SPINK2表达质粒时,SPAG6与SPINK2共定位在细胞核周围;SPAG6 KO小鼠睾丸生精细胞中未检测到SPINK2表达及定位于精子顶体. 结论:SPAG6与SPINK2形成蛋白复合体,并可能通过调控SPINK2的稳定表达参与精子顶体形成.
关键词:精子相关抗原6丝氨酸蛋白酶抑制剂2小鼠精子顶体雄性不育
分类号:Q954.43+4(动物形态学)
资助基金:国家自然科学基金(81671514)国家自然科学基金(81571428)湖北省自然科学基金(2018CFB114)湖北省自然科学基金(2018CFA040)武汉科技大学青年科技骨干培育项目(2017xz041)
论文发表日期:2019-03-20
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 202-208 )
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