Dnajb13在隐睾小鼠睾丸中的表达及其与生精细胞凋亡的关系
贾苗苗1
石林2
施文浩1
薛侠1
赵政豪1
刘刚2
1.西北妇女儿童医院生殖医学中心,陕西西安7100002.中南大学生殖与干细胞工程研究所,湖南长沙410013
摘要：目的:通过分析热休克蛋白40家族成员Dnajb13在成年小鼠生精细胞中的定位,研究其mRNA和蛋白在隐睾小鼠睾丸中表达量和定位的变化情况,初步探讨其在生精细胞凋亡中的作用. 方法:手术建立单侧隐睾小鼠模型,采用免疫组化方法研究Dnajb13在小鼠生精细胞中的定位;采用TUNEL、流式细胞检测结合形态学观察确认小鼠隐睾模型是否建立成功,并分析生精细胞凋亡情况;采用qPCR、Western印迹以及免疫组化分析隐睾手术后第1、2、3、4、6、9和15天与正常侧相比隐睾侧Dnajb13 mRNA和蛋白的表达及定位变化情况. 结果:免疫组化结果显示在成熟小鼠正常睾丸组织中,Dnajb13表达于生精上皮周期Ⅸ～XⅥ期长形精子中;成功构建隐睾小鼠模型.TUNEL结合流式细胞检测表明Ⅰ期圆形精子以及分裂期初级精母细胞对温度升高最敏感,隐睾模型手术后最早发生凋亡的生精细胞是圆形精子细胞(Ⅰ～Ⅷ期),从17.09％降为6.52％ (P ＜0.05),随后是变形期精子细胞(Ⅸ～XⅥ期),最后为初级精母细胞;qPCR结果显示术后第3天Dnajb13 mRNA表达量轻微上升,约为正常侧的1.6倍(P＜0.05),第4天开始下降,约为正常侧的1.2倍;Western印迹结果显示术后第1～3天Dnajb13蛋白表达量无显著变化,第4天开始下降为正常侧的0.68倍(P＜0.05),至第9天均急剧降下降为正常侧的0.4倍,Dnajb13在术后第6天已经凋亡的多核巨细胞中开始表达. 结论:Dnajb13定位于成熟小鼠变形期精子细胞以及成熟精子尾部,参与了精子变形过程以及精子鞭毛的形成.隐睾状态下Dnajb13在凋亡的多核巨细胞中表达,可能参与了Ⅵ～Ⅷ阶段的圆形精子细胞的凋亡.
关键词：隐睾Dnajb13凋亡
分类号：R323.1(人体形态学)
资助基金：湖南省自然科学基金(13JJ2007)国家自然科学基金(2018SF-260)西北妇女儿童医院院内项目(2018ZD02)西北妇女儿童医院院内项目(2018JC01)
论文发表日期：2020-03-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 228-236 )
英文信息