AAPH体外诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激模型建立与评价
周兴
唐雪
李波男
周海亮
宁港
商学军
摘要：目的:利用偶氮二异丁脒盐酸盐(AAPH)作为刺激源,建立体外小鼠睾丸间质细胞(LCs)氧化应激损伤模型,并进行生理功能评价. 方法:实验一将小鼠睾丸间质细胞(TM3)随机分为6组,分别加入0、1、5、10、50和100 mmol/L AAPH,分别作用4、8、24 h.测定TM3细胞活性(MTS法)、衰老情况(β-半乳糖苷染色法)、线粒体膜电位(JC-1荧光法)、线粒体DNA拷贝数(QPCR法).实验二在实验一筛选得出AAPH作用浓度区间(≤10 mmol/L)基础上,将TM3细胞随机分为9组,分别加入0、0.1、0.5、1、2、4、6、8和10 mmol/L AAPH,分别作用24、48、72 h.测定TM3细胞活性、ROS水平、衰老情况.筛选出AAPH诱导TM3细胞氧化应激损伤的最佳作用浓度和作用时间. 结果:实验一表明,4 h 50 mmol/L、8 h 10 mmol/L、24 h 5 mmol/L AAPH组TM3细胞存活率均≥50％,AAPH初步浓度应≤10 mmol/L,作用时间可≥24 h.实验二表明,24 h 6 mmol/L AAPH组TM3细胞存活率≥70％、ROS阳性率为56.88％、线粒体膜电位正常、mtDNA拷贝数上升、未出现衰老,可以作为诱导TM3细胞氧化损伤模型的适宜条件. 结论:AAPH浓度6 mmol/L,作用时间24 h,可作为诱导TM3细胞氧化损伤模型的适宜条件.
关键词：睾丸间质细胞氧化应激AAPH细胞模型
分类号：R698+.2(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)
论文发表日期：2021-01-01
页数：8( 3-10 )
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