基于Cre/LoxP系统建立睾丸Occludin基因敲除小鼠模型
蒲顺昌1
张宇1
陆宁1
陈德宇2
1.亳州学院生物与食品工程系,安徽亳州236800;药食同源功能食品亳州市重点实验室,安徽亳州2368002.阜阳师范大学生物与食品工程学院,安徽阜阳236000
摘要：目的:基于Cre/LoxP系统建立睾丸Occludin基因敲除小鼠模型,并进一步观察其表型变化差异.方法:使用Cre-LoxP系统构建Occludin-floxed(基因型Floxp/-)小鼠,与AQP2-cre(基因型Cre/-)小鼠进行杂交,得到睾丸内Occludin条件性敲除小鼠(基因型Floxp/Floxp Cre/-.利用PCR及Southern印迹技术鉴定F1代敲除小鼠基因型,利用qPCR,Western印迹以及免疫组化鉴定Occludin敲除小鼠中Occludin蛋白表达来验证Occludin敲除小鼠获得成功.比较实验鼠与正常鼠的精子数量,分析其生育能力.结果:Southern印迹和PCR结果我们成功地获得了Occludin基因敲除的目标小鼠.Occludin基因敲除小鼠较正常小鼠Occludin蛋白表达减少,精子数量减少,生育能力降低.差异显著(P＜0.05).结论:采用Cre-LoxP技术可成功构建Occludin基因敲除小鼠,并且Oc-cludin的缺乏会对小鼠的生殖功能产生影响.
关键词：Cre-loxP系统Occludin蛋白基因敲除
分类号：R34(基础医学)R392(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(81771567)
论文发表日期：2021-08-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 685-693 )
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