玻璃化冷冻及慢速程序化冷冻对未成熟睾丸组织的保护效果分析
马朦惠
苏文龙
吕林艳
陈海城
方丛
孙鹏
刘贵华
中山大学附属第六医院生殖医学中心,广东 广州 510000;广州市黄埔区中六生物医学创新研究院,广东 广州 510000;广东省生育力保存工程技术研究中心,广东 广州 510000
摘要:目的:探究比较目前常见主流睾丸组织冷冻方法学,即玻璃化冷冻与慢速程序化冷冻,筛选适宜的睾丸组织冷冻方法.方法:分别收集3周龄小鼠及<2岁龄青春期前食蟹猴的睾丸组织,将其剪碎至6~26 mm3,均分为3组:新鲜组、玻璃化冷冻组和慢速程序化冷冻组,在冷冻5~7 d后复苏冷冻睾丸组织,使用HE染色、免疫荧光染色、TUNEL染色和Western印迹对冷冻-复苏睾丸组织进行评估.结果:①在C57BL6/J小鼠睾丸组织中,慢速程序化冷冻组精原干细胞标志物UCHL1表达量高于玻璃化冷冻组,凋亡细胞(TUNEL+细胞)含量低于玻璃化冷冻组.②食蟹猴睾丸组织中,慢速程序化冷冻组精原干细胞标志物UCHL1、细胞增殖标志物PCNA的表达量高于玻璃化冷冻组.结论:玻璃化冷冻和慢速程序化冷冻均可成功保存青春期前未成熟的小鼠及食蟹猴睾丸组织.但是在玻璃化冷冻保存中,对于冻存体积为6~26 mm3的睾丸组织存在更多冷冻损伤区域,可能影响睾丸组织中精原干细胞的冷冻储存效果.
关键词:玻璃化冷冻慢速程序化冷冻男性生育保存精原干细胞
分类号:R321.1(人体形态学)
论文发表日期:2023-09-20
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 776-782 )
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