模拟精索静脉曲张中缺氧和高压复合条件介导睾丸微环境改变的细胞模型构建与评价
梁树麟1
耿立果2
韩凌1
容礎南1
覃湛2
杜娟2
何超拔2
袁少英3
1.广州中医药大学第二临床医学院,广东 广州 5100062.广东省中医院珠海医院男科,广东珠海 5109153.广州中医药大学第二临床医学院,广东 广州 510006;广东省中医院珠海医院男科,广东珠海 510915
摘要：目的:精索静脉曲张(VC)通过介导睾丸微环境的改变从而造成男性不育症的发生,其中睾丸缺氧、高压是重要的病理条件.本研究旨在通过比较单纯缺氧造模与缺氧高压复合造模后的小鼠精母(GC-2spd)细胞与睾丸支持(TM4)细胞,探讨建立缺氧高压复合细胞模型的可行性.方法:在氯化钴诱导细胞缺氧的基础上,使用高浓度氯化钠溶液改变GC-2与TM4细胞培养基渗透压构建睾丸细胞缺氧高压复合模型;通过MTT试验筛选氯化钴干预浓度与检测HIF-1α的表达水平确定细胞模型最佳渗透压条件后,将细胞分为正常组、缺氧组与复合模型组,比较正常组与不同造模方法组细胞的氧化应激(OS)水平、细胞凋亡、炎症因子水平及焦亡相关蛋白的表达水平.结果:GC-2与TM4细胞氯化钴最佳干预浓度分别为150和250 μmol/L,且都在500 mOsmol/kg的渗透压条件下HIF-1α表达量最高(P＜0.05).与正常组比较,经缺氧高压复合造模的GC-2与TM4细胞SOD水平降低(P＜0.05),CAT水平降低(P＜0.05),MDA水平升高(P＜0.01),且与缺氧组比较细胞的OS水平更显著(P＜0.05).与正常组比较,复合造模后的GC-2与TM4细胞更能诱导发生细胞凋亡(P均＜0.05).与正常组比较,经缺氧高压复合造模的GC-2与TM4细胞中IL-1β、IL-18、TNF-α、COX-2 mRNA表达显著上升(P＜0.01),并高于缺氧组(P＜0.05),能诱导细胞焦亡的发生(P＜0.01),且GSDMD表达水平增加(P＜0.05).结论:经缺氧高压复合造模的细胞模型相较单纯缺氧细胞模型能更好地诱导细胞OS反应与细胞凋亡,进一步引起炎症反应损伤与细胞焦亡的发生,可模拟VC中缺氧高压复合条件所介导的睾丸微环境改变.该模型可用于VC性不育症的病理机制研究、药效评价和药理机制探索.
关键词：精索静脉曲张不育症缺氧高压细胞模型睾丸细胞小鼠
分类号：R697+.24(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)
论文发表日期：2025-06-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 483-491 )
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