EGFP在EGFP/GDNF融合基因修饰骨髓基质干细胞中的示踪作用
姜晓兵1
赵洪洋2
周凤1
刘如恩1
周伟1
张建国1
1.华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科,湖北,武汉,4300222.深圳市眼科医院一病区,广东,深圳,580000
摘要：目的探索增强型绿色荧光蛋白(EGFP)能否作为标记基因追踪胶质源性神经生长因子(GDNF)基因修饰的骨髓基质干细胞(MSC)在体内外的存活、生长、分化和表达外源目的基因的情况.方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法从新生小鼠大脑皮质细胞克隆出GDNF cDNA片断,连入pEGFP-C1载体,构建表达EGFP和GDNF融合蛋白的质粒并转染MSC,将稳定表达EGFP-GDNF基因的细胞株植入小鼠纹状体.用荧光显微镜和免疫组织化学的方法在体内外观察MSC.结果成功制备EGFP-GDNF融合基因修饰的MSC工程细胞,免疫组织化学方法检测显示GDNF呈强阳性,在体内外MSC工程细胞均发出明亮的绿色荧光,并且绿色荧光可反映细胞形态学变化.结论在EGFP-GDNF融合基因修饰的MSC工程细胞中EGFP可作为标记基因同时标记GDNF和MSC.
关键词：胶质细胞源性神经营养因子骨髓干细胞增强型绿色荧光蛋白基因转染
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 529-532 )
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