脂质体介导EGFP基因转染神经干细胞实验研究
刘建雄1
毛伯镛2
李东燕1
乔栎1
1.甘肃省人民医院神经外科,甘肃,兰州,7300002.四川大学华西医院神经外科,四川,成都,610041
摘要：目的用增强绿色荧光蛋白基因(EGFP)的表达载体pIRES2-EGFP转染神经干细胞(neural stem cells,NSCs),检测该真核表达载体对NSCs的转染效率及EGFP的表达状态,为用NSCs为载体基因治疗中枢神经系统疾病提供实验依据.方法体外扩增、酶切鉴定pIRES2-EGFP质粒;悬浮培养NSCs;阳离子脂质体lipofectamineTM2000介导增强绿色荧光蛋白质粒转染NSCs;庆大霉素的氨基糖苷(G418)筛选重组子;荧光显微镜观察转染效率及表达情况;免疫细胞化学鉴定重组子.结果转染后6 h,荧光蛋白偶见表达,24 h表达量明显增加,48 h达到最高峰,1个月后抗性细胞有克隆球形成.结论脂质体介导报告基因-pIRES2-EGFP转染NSCs的方法简单、效率高、易成功,是一较为理想的基因转染方法.
关键词：增强绿色荧光蛋白基因神经干细胞基因转染脂质体
分类号：Q253(细胞生理学)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 16-18 )
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