针对MAGE-1基因RNAi在恶性胶质瘤SHG-44细胞中的作用研究
程光1
章翔1
鲍炜2
张赟2
张新海2
曹卫东1
高大宽1
宋蕾1
1.第四军医大学,西京医院全军神经外科研究所,陕西,西安,7100322.第四军医大学,免疫学教研室,陕西,西安,710032
摘要：目的构建抑制黑色素瘤抗原-1(MAGE-1)的siRNA表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞系SHG-44细胞中对MAGE-1基因表达的干涉作用.方法化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE-1基因寡核苷酸链,克隆到经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建RNA干涉 (RNAi)质粒载体.利用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术和荧光显微镜,检测经稳定转染后SHG-44细胞中MAGE-1的表达,以了解siRNA的干扰效果. 结果重组构建的pSUPER-MAGE-1载体经双酶切电泳及插入基因片段序列分析,表明寡核苷酸链成功插入到预计位点,并且序列与预期完全一致.稳定转染后G418筛选出的SHG-44多克隆细胞MAGE-1的表达经RT-PCR、流式细胞术和荧光显微镜检测,2对siRNA均有较明显的干涉作用. 结论成功构建了针对MAGE-1基因的siRNA表达载体,抑制SHG-44细胞中的MAGE-1分子的表达.
关键词：RNA干涉小干涉RNApSUPER黑色素瘤抗原-1神经胶质瘤SHG-44细胞
分类号：R730.264(一般性问题)
资助基金：中国科学院项目（非规范项目）(39970752)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 106-110 )
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