神经元和胶质细胞共培养方法的建立
刘利1
林志国1
沈红1
车彦军1
张帆2
白云龙3
龚冬梅3
王景贺4
1.哈尔滨医科大学第一附属医院,神经外科,黑龙江,哈尔滨,1500012.哈尔滨医科大学第一附属医院,麻醉科,黑龙江,哈尔滨,1500013.哈尔滨医科大学第一附属医院,药理学教研室,黑龙江,哈尔滨,1500014.哈尔滨工业大学精密工程研究所,黑龙江,哈尔滨,150001
摘要：目的 介绍改良的Banker共培养方法,并通过膜片钳、原子力显微镜检验神经元的生长状态.方法 利用烙铁在培养皿底面滴入4个高度约为0.1 mm的石蜡,以支持盖玻片建立共培养体系.当星形胶质细胞生长至底面积70%～80%后,将胰酶消化、分离的神经元接种在盖玻片上,4 h后翻转盖玻片并移到含有星形胶质细胞的培养皿内,进行共培养,4～5 d半量换液.膜片钳记录神经元动作电位和自发性突触后电位,原子力显微镜观察培养25 d的神经元生长状态.结果 神经元最长培养40 d,接种后4 h～6 d和9～13 d是两个快速增长期.膜片钳实验中,神经元能够产生动作电位,并且随刺激强度增大动作电位频率增加;能够记录到神经元的兴奋性突触后电位(EPSP)、抑制性突触后电位(IPSP)和自发性动作电位(sAP).原子力显微镜观察可见神经元胞体呈典型锥体形状,细胞表面光滑平整.结论 神经元和胶质细胞共培养方法稳定性强,容易操作,培养的神经元存活时间长、生长状态良好.
关键词：共培养膜片钳原子力显微镜
分类号：R329.2(人体形态学)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 317-320 )
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