肿瘤血管抑制肽alphastatin重组腺伴随病毒的制备
郭世文1
杨宇2
王全颖3
廉民学1
李涛1
王东峰1
1.西安交通大学医学院第一附属医院神经外科,陕西,西安,7100612.吉林大学第一医院神经内科,吉林,长春,1300213.西安华广生物工程有限公司,陕西,西安,710025
摘要：目的 构建并产生肿瘤血管抑制肽alphastatin(Al)重组腺伴随病毒(rAAV)载体.方法 将目的基因alphastatin插入载体质粒pSSHG-巨细胞病毒(CMV)的EcoR I和BamH I位点,构建重组质粒pSSHG-CMV/NT4-Al.用腺病毒辅助质粒pFG140代替野生型腺病毒,包装质粒pAAV/Ad及已构建的重组腺伴随病毒载体质粒,使用三质粒共转染法转染293细胞,包装得到腺伴随病毒(AAV)-Al.采用氯仿抽提、聚乙二醇沉淀回收纯化,斑点杂交方法测定重组病毒滴度.结果 重组病毒rAAV-Al滴度约为2×1012颗粒/ml.结论 成功制备了重组病毒rAAV-Al,提供了一种生产足量安全的rAAV-Al简单易行的方法,为肿瘤的基因治疗实验奠定了基础.
关键词：alphastatin腺伴随病毒斑点杂交
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(30672162)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 518-521 )
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