人源性Notch 1胞内段真核表达载体的构建及鉴定
李斌1
梁亮2
甄海宁1
林伟1
晁晓东1
董文鹏1
李娟1
章翔1
1.第四军医大学西京脑科医院神经外科,陕西,西安,7100322.第四军医大学基础部医学遗传学与发育生物学教研室,陕西,西安,710032
摘要：目的 构建人源性Notch 1胞内段(NICD)真核表达载体pIRES2-EGFP-NICD,并观察其在真核细胞中的表达.方法 通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从人脑胶质母细胞瘤细胞系U251细胞中获得编码NICD的cDNA,定向克隆至真核表达载体pIRES2-EGFP;经酶切和测序鉴定正确后,应用脂质体法转染HeLa细胞,并通过蛋白免疫印迹法检测细胞内NICD的表达.结果 构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-NICD,将其转染HeLa细胞72 h后,蛋白免疫印迹法检测到细胞内NICD的表达显著增高.结论 成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-NICD,为研究Notch信号通路在人脑胶质细胞瘤发生发展中的作用机制奠定了基础.
关键词：Notch信号胶质细胞瘤真核表达
分类号：R739.4(神经系肿瘤)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 32-36 )
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