免疫磁珠法分离、培养人脑胶质瘤干细胞
魏宇佳1
赵洪洋2
姜晓兵2
靳峰2
武汉
1.华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科,湖北华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科,湖北华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科,湖北华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科,湖北华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科,湖北2.华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科,湖北
摘要:目的 建立免疫磁珠法分离,并培养人脑胶质瘤干细胞的方法. 方法 将术中取得的脑胶质瘤标本,通过剪切、消化和吹打成单细胞悬液,筛网过滤,免疫磁珠分选试剂盒分选出CD133+细胞,用神经干细胞无血清培养法培养出具有单细胞克隆能力的细胞球,取第3代进行诱导分化,分化前后用免疫细胞荧光化学方法鉴定肿瘤干细胞及分化后细胞. 结果 免疫磁珠分选出的CD133-细胞,可悬浮生长并形成神经干细胞样细胞球,有较强的增殖能力,干细胞标志物巢蛋白(nestin)阳性,分化后细胞表达神经元小管相关蛋白β-3(β-tubulin 3)和星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白质(GFAP)特异性抗原,而巢蛋白、CD133阴性,并具有肿瘤的核型. 结论 免疫磁珠分选法可避免原代培养中众多细胞混杂牛长的发生,能够从大量肿瘤细胞中分离出只占极少比例的肿瘤干细胞,细胞结合磁珠后在体外可以长期培养和传代,进一步证实了肿瘤干细胞的存在,并为胶质瘤干细胞的研究奠定基础.
关键词:肿瘤干细胞胶质瘤细胞分选
分类号:R739.41(神经系肿瘤)
资助基金:国家自然科学基金(30500522)
论文发表日期:2008-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 426-430 )
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中华神经外科疾病研究杂志

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ISSN:1671-2897
年,卷(期):2008,7(5)
所属栏目:论著