MDR1 shRNA对人脑胶质瘤干细胞多药耐药性实验研究
于如同1
陈冲2
石琼1
刘明峰2
饶海承2
1.徐州医学院,附属医院神经外科,江苏,徐州,2210022.徐州医学院,神经外科,江苏,徐州,221002
摘要：目的 构建多药耐药基因(MDRl)的短发卡RNA表达质粒,并检测其对胶质瘤干细胞药物敏感性的作用.方法 培养脑胶质瘤干细胞;根据MDR1的DNA序列没计shRNA,用Siport xp-1脂质体法转染胶质瘤干细胞.分别采用定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot检测转染前后MDR1 mRNA和蛋白表达情况;使用活细胞计数试剂盒(CCK-8)对转染后细胞进行药物敏感性试验,评价shRNA对多药耐药性的逆转作用.结果 成功构建MDR1 shRNA表达质粒,转染组MDR1mRNA表达水平有所F降(P＜0.05),转染5 d组下降最明显;RT-PCR结果显示MDR1 mRNA水平降低,第3、5、7 d抑制率分别为78.46%±14.17%,82.02%±11.87%,79.5%±13.27%.Western blot结果显示:shRNA转染组P-糖蛋白(P-gP)的表达降低,第3、5、7 d抑制率分别为58.1%±6.5%,39.5%±5.2%,45.8%±8.6%;而药敏实验显示:阿霉素、长春新碱对转染MDR1 shRNA的胶质瘤干细胞的半数抑制浓度(IC50)均有不同程度降低,且出现凋亡峰(P＜0.05).结论 MDRI短发卡RNA可在转录后水平对多药耐药进行调节,下调MDR1基因表达,提高药物敏感性,诱导细胞凋亡.
关键词：胶质瘤干细胞shRNA多药耐药基因(MDR1)基因治疗
分类号：R741(神经病学)
资助基金：江苏省医学领军人才项目(LJ200622)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 494-497 )
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