Lentivirus介导RNAi抑制人胶质瘤干细胞STAT3基因生物学效应观察
李光辉1
纪华2
陈正堂1
吕胜青3
胡义德1
王东林4
1.第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所,重庆,4000372.解放军昆明总医院肿瘤科,云南,昆明,6500313.第三军医大学新桥医院神经外科,重庆,4000374.同济大学附属同济医院肿瘤科,上海,200065
摘要：目的 了解慢病毒载体对胶质瘤干细胞的亲嗜性及对靶基因表达的干扰效率,初步探索干扰STAT3基因对胶质瘤干细胞增殖的影响.方法 构建STAT3基因sh是RNA的慢病毒表达载体,经293T细胞包装后,获得可表达STAT3基因shRNA的慢病毒颗粒;活性载体病毒感染人原代胶质瘤干细胞后流式细胞分析细胞感染效率;实时定量多聚酶链反应(PCR)和Western blot检测细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达及活化水平;增殖分析试剂盒测定细胞生长曲线,流式细胞分析细胞周期分布.结果 在病毒感染比率值20:1时慢病毒载体对人原代胶质瘤干细胞的感染效率为98.6%;细胞感染可表达STAT3基因shRNA的载体慢病毒后,STAT3基因mRNA显著下降,抑制率为84.3%,STAT3蛋白表达下降81.5%,活化的pSTAT3下降97.9%;胶质瘤下细胞STAT3表达、活化受抑后细胞生长显著变慢,G1期细胞比例显著增高.结论 慢病毒载体对人原代胶质瘤干细胞有着很高的感染效率,介导的RNAi可显著抑制靶基因的表达与活化,是对人胶质瘤十细胞基因功能研究的理想工具.人胶质瘤干细胞STAT3基因受抑后细胞生长显著变慢,出现G1期阻滞.
关键词：胶质瘤干细胞慢病毒载体RNA干扰增殖细胞周期
分类号：R739.41(神经系肿瘤)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 498-501 )
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