PYGO2基因RNA干扰真核表达载体的构建
王海东1
苏新辉2
王占祥1
马永会1
谭国伟1
1.厦门市第一医院,神经外科,福建,厦门,3610062.厦门市第一医院,核医学科,福建,厦门,361006
摘要：目的 构建PYGO2基因RNA干扰(RNAi)的真核细胞表达载体.方法 以PYGO2为靶基因,以pSUPER.puro质粒为载体,设计构建重组体,根据基因库(GenBank)提供的PYGO2基因核苷酸序列,在 Target Finder软件进行目的基凶的siRNA序列对应DNA的设计与筛选,选择设计两条带发夹结构的核苷酸序列,克隆到空载体pSUPER.puro中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析,将重组的pSUPER.puro-PYGO2质粒转染胶质瘤C6细胞48 h,检测其对该细胞PYGO2蛋白的影响.结果 经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体显著降低胶质瘤细胞PYGO2的蛋白表达,重组载体构建成功.结论 利用RNAi技术可成功构建抑制PYGO2表达的siRNA真核表达载体.
关键词：PYGO2RNA干扰真核表达载体构建
分类号：R346(基础医学)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 127-130 )
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