MRP1siRNA逆转胶质瘤多药耐药的体外研究
陈玲1
李骁博2
曾燕燕1
王媛3
武卓1
章文斌1
刘宏毅1
杨竟1
肖红1
1.南京医科大学附属脑科医院,江苏南京,2100292.中国药科大学,江苏南京,2100053.南京绿叶思科药业有限公司,江苏南京,210061
摘要:目的 探讨siRNA对人神经胶质瘤细胞U251的多药耐药的影响,为RNAi的体内研究提供依据.方法 利用已初步筛选有效的MRP1 siRNA序列,转染U251等三种肿瘤细胞,采用逆转录酶聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测MRP1 mRNA和蛋白的表达;采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)法检测细胞对化疗药物的敏感性改变.结果 细胞转染siRNA2和siRNA4,反转录聚合酶链式反应( reverse transcription-PCR,RT-PCR)和Western blot结果显示转染后多药耐药相关蛋白1(multidrug resistanec-associated protein 1,MRP1) mRNA和蛋白的表达较未转染组均明显下降;药敏结果显示,转染后肿瘤细胞对表柔比星和长春新碱的敏感性增加,而对紫杉醇的敏感性没有明显改变;RT-PCR、Western blot和MTT实验证实siRNA2是最有效的siRNA序列.结论 siRNA2是体外实验中筛选出的最有效的抑制MRP基因表达的序列,针对MRP1的siRNA通过降低MRP1 mRNA和蛋白的表达,可使肿瘤细胞对化疗药物的敏感性增强,逆转肿瘤细胞的多药耐药.
关键词:siRNAMRP1多药耐药U251细胞
分类号:R739(肿瘤学)
论文发表日期:2011-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 503-507 )
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