成人脑神经干细胞体内外增殖、分化和迁移研究
马献昆1
李建华2
宋丽惠2
郭欣茹3
王淑为3
刘爽3
1.新疆生产建设兵团医院神经外科,新疆乌鲁木齐830002;海军总医院神经外科,北京1000482.新疆生产建设兵团医院神经外科,新疆乌鲁木齐,8300023.海军总医院神经外科,北京,100048
摘要:目的 探索从成人脑组织获取的神经干细胞(成人-hNSCs)在体外的增殖能力、分化特性、以及在裸鼠颅内的存活、迁移及分化情况.方法 分别留取癫痫患者手术切除的颞叶脑组织和10 w左右人类自然流产胎儿纹状体组织,体外分离成单细胞悬液,无血清培养基培养、传代并诱导分化.软琼脂糖集落形成实验检测NSCs的增殖能力.免疫荧光法检测NSCs标志物神经上皮巢蛋白(Nestin)和诱导分化后神经元标志物β-tubllin以及神经胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;利用动物立体定向仪将体外悬浮培养2w的人NSCs移植入裸鼠颅内,检测NSCs在裸鼠脑组织局部的存活、迁移和分化状况.结果 成人-hNSCs集落形成能力较胚胎脑组织来源的NSCs(胎儿-hNSCs)明显减弱,免疫荧光染色显示分离的NSCs呈Nestin阳性,诱导分化后可见(β-tubllin和GFAP 阳性的神经细胞,其中80%的细胞为GFAP阳性的星形胶质细胞,20%左右为p-tubllin阳性细胞.分别将成人-hNSCs和胎儿-hNSCs移植入裸鼠纹状体,1个月后,冰冻切片,荧光显微镜观察到来源于成人脑组织来源的NSCs仅见沿针道的近距离迁移,免疫荧光染色在成人-hNSCs移植裸鼠颅内只检测到GFAP阳性的星形胶质细胞.而胎儿-hNSCs可穿过针道,沿大脑廉向脑实质广泛迁移,免疫荧光染色能检测到GFAP和少量(β-tubllin阳性细胞.结论 成人脑组织和胚胎纹状体组织中均能成功分离到神经前体细胞,而与胎儿-hNSCs相比,成人-hNSCs体外增殖能力、多向分化潜能和体内迁移能力都明显减弱.
关键词:神经干细胞成人脑组织增殖分化迁移
分类号:R617(外科手术学)
资助基金:国家自然科学基金(81172384)
论文发表日期:2013-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 421-425 )
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中华神经外科疾病研究杂志

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ISSN:1671-2897
年,卷(期):2013,12(5)
所属栏目:论著