淡色库蚊CYP6F1基因的克隆及表达差异的鉴定
公茂庆1
刘波1
胡小邦2
孙艳2
李秀兰2
马磊2
朱昌亮2
1.山东省寄生虫病防治研究所,山东,济宁,2720332.南京医科大学,江苏,南京,210029
摘要：目的 克隆淡色库蚊细胞色素P450(CYP6F1)基因并进行表达差异的鉴定.方法 采用RT-PCR技术和RACE策略,从淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系Ⅳ龄幼虫中克隆细胞色素P450基因(CYP6F1),用相应的软件进行生物信息学分析,并用实时定量PCR和RT-PCR技术分析敏感、抗性品系蚊的CYP6F1表达水平及对蚊各期CYP6F1进行表达鉴定. 结果成功克隆出CYP6F1基因,基因全长1 639 bp,开放阅读框为1 527 bp,编码508个氨基酸(GenBank 登录号:AY662654).序列分析显示该基因与已克隆的日本致倦库蚊细胞色素P450基因(CYP6F1)有99%的同源性,并具有所有的细胞色素P450基因的保守性特征, 一个膜锚定信号、两个还原酶结合位点、一个的典型的血红素蛋白结合位点和ETLR基序等.实时定量PCR和半定量RT-PCR结果表明,CYP6F1在淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系中表达水平高于敏感品系,且CYP6F1基因在淡色库蚊各个发育阶段有不同的表达.结论 CYP6F1基因可能与杀虫剂抗药性相关,并且在各个发育阶段有不同的表达.
关键词：淡色库蚊抗药性细胞色素P450RT-PCR基因克隆
分类号：R384.1(医学寄生虫学)
资助基金：国家自然科学基金(30371755)山东省自然科学基金(Y2007C2008)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 100-104 )
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