寨卡病毒NS1单克隆抗体制备及其在临床诊断中的应用
王怡雯1
匡衡2
杨展1
郑峰1
朱进1
1.东部战区疾病预防控制中心,江苏南京2100022.安徽医科大学附属八一临床学院传染病科,江苏南京210000
摘要：目的 用寨卡病毒非结构蛋白NS1免疫小鼠并制备鼠源单克隆抗体,建立捕获ELISA方法检测寨卡病毒NS1蛋白.方法 合成NS1基因序列构建真核表达载体pcDNA3.1-NS1,转染HEK293细胞收集上清,经Ni+柱亲和层析法纯化NS1蛋白.以纯化的NS1重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取脾脏进行细胞融合,筛选阳性细胞株,经酶联免疫吸附检测抗体活性和特异性.结果 成功表达并纯化NS1重组蛋白,获得7株单克隆抗体,筛选非竞争单抗组合建立捕获ELISA法,该方法可特异性识别NS1重组蛋白,最低检出限为1 ng/ml,且未与其他黄病毒属病毒发生交叉反应.结论 成功制备特异性抗寨卡病毒NS1蛋白的鼠源单克隆抗体,建立捕获ELISA法,为寨卡疫情的进一步防控奠定了基础.
关键词：寨卡病毒NS1蛋白单克隆抗体捕获ELISA法
分类号：R183.5(流行病学与防疫)
资助基金：国家生物安全专项(AWS17J016)国家生物安全专项(2019SWAQ05-5-4)江苏省社会发展项目(BE2018617)
论文发表日期：2021-02-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 58-61 )
英文信息