基于重组酶聚合酶扩增技术快速检测间日疟原虫方法的建立及应用
罗鹏1
孙菲2
张荣3
吕沁风1
阮卫4
娄家怡1
陈淑丹1
杨国平3
1.杭州国际旅行卫生保健中心(杭州海关口岸门诊部),浙江 杭州 3100122.湖南国际旅行卫生保健中心(长沙海关口岸门诊部),湖南 长沙 4101143.江苏国际旅行卫生保健中心(南京海关口岸门诊部),江苏 南京 2100194.浙江省疾病预防控制中心,浙江 杭州 310009
摘要：目的 建立一种用于快速检测间日疟原虫 Plasmodium vivax 的重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)方法.方法 以间日疟原虫 18S rRNA基因为靶标,根据RPA技术原理设计引物和探针,构建 18S rRNA基因片段的质粒DNA为标准品,进行引物探针筛选和灵敏度检测;以间日疟原虫、恶性疟原虫、三日疟原虫、卵形疟原虫、人全血核酸、乙型脑炎病毒以及黄热病毒核酸评价方法的特异性;最后用实际样本来评估方法与PCR检测的一致性.结果 所建立的方法在39℃20 min内,可以最低检测出10拷贝/反应的质粒DNA,并且与其他病原体核酸无交叉反应.样本检测结果显示,测试的结果同PCR检测具有一致性.结论 建立的重组酶聚合酶扩增方法具有灵敏度高以及特异性强的特点,可应用于间日疟原虫的快速检测.
关键词：间日疟原虫重组酶聚合酶扩增分子检测
分类号：R382.3+1(医学寄生虫学)
资助基金：海关总署科技项目(2022HK094)海关总署科技项目(2024HK267)海关总署科技项目(2024HK167)
论文发表日期：2025-04-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 154-157 )
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