从人源大容量噬菌体抗体库中筛选抗生存素抗体
王欲晓1
解鹏1
高荣凯1
杨东玲2
周丽君1
1.海军总医院基础医学研究中心,北京,1000482.生物大分子国家重点实验室,北京,100101
摘要:目的 从大容量天然噬菌体抗体库中筛选抗生存素(survivin)的人源单链抗体(single chain fragment variable,scFv)并进行鉴定.方法 以survivin为抗原,固化在抗原管上,通过吸附-洗脱-扩增过程,从大容量天然噬菌体抗体库中筛选特异性噬菌体抗体,并转染HB2151菌,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导制备成可溶性抗体,采用酶联免疫吸附测定法对其抗原结合活性进行检测,指纹图谱分析法分析抗体基因的种类.结果 经过4轮筛选,共获得21个与survivin结合的阳性克隆,其中10个特异性结合的克隆,指纹分析有8种不同的抗survivin的scFv基因,在这8种中有5种获得可溶性表达.结论 利用噬菌体抗体库技术获得了特异性的人源抗生存素抗体,为其在今后肿瘤治疗中的应用奠定基础.
关键词:大容量抗体库生存素噬菌体抗体可溶性抗体
分类号:R392.11(医学免疫学)
资助基金:国家自然科学基金(81172119)生物大分子国家重点实验室资助(05SY021117)
论文发表日期:2012-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 84-87 )
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