光刺激体外培养的 NG2细胞对海马神经元内Ca2+活性和电活动的影响
郭大志1
刘怿君2
潘树义1
何成3
段树民2
1.海军总医院高压氧科, 北京,1000482.浙江大学神经科学研究所, 浙江 杭州,3100583.第二军医大学神经生物学教研室, 上海,200433
摘要:目的:观察选择性光刺激 NG2细胞对海马神经元内 Ca 2+活性和电活动的影响,并初步探讨可能的作用机制。方法体外纯化培养新生 SD 大鼠 NG2细胞,通过脂质体转染的方法,在 NG2细胞中特异性表达光敏感通道(channelrhodopsin-2,ChR2)蛋白 DNA,并与体外培养7 d 的海马神经元共培养48 h,采用蓝光(470 nm、5 s、5 mW/cm2)选择性刺激表达 ChR2蛋白的 NG2细胞,利用 Ca2+成像和电生理的方法记录 NG2细胞周围海马神经元中的 Ca 2+浓度变化和电流改变情况,同时比较加入/未加入γ-氨基丁酸 A 型受体抑制剂情况下神经元的电流变化特点。结果当蓝光刺激表达 ChR2蛋白的 NG2细胞后,首先 NG2细胞内的 Ca 2+信号增强,随后其周围海马神经元内的 Ca2+升高约20%;Ca2+缓慢下降后再次出现一个 Ca2+峰,幅度较第1次小;NG2细胞周围海马神经元的电流频率增加,振幅增大。而当预先在细胞外液中加入50μmol/L γ-氨基丁酸 A 受体抑制剂后,海马神经元的电流频率和振幅较未加抑制剂组明显减小(P<0.05)。结论选择性光刺激表达 ChR2蛋白的 NG2细胞可使其兴奋,且可能通过释放γ-氨基丁酸来调节神经元活动。
关键词:NG2 细胞光敏感通道神经元γ-氨基丁酸
分类号:R338.1-332(人体生理学)
资助基金:国家自然科学基金(81401063)
论文发表日期:2015-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 208-212 )
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