Ras同源物基因家族成员B对肾透明细胞癌细胞生长及迁移能力的影响
陈伟浩
徐衍盛
欧阳昀
王希友
吴意光
张新宇
王毅
周茂军
赵豫波
关维民
刘萃龙
1.海军总医院泌尿外科, 北京,1000482.海军总医院泌尿外科, 北京,1000483.海军总医院泌尿外科, 北京,1000484.海军总医院泌尿外科, 北京,1000485.海军总医院泌尿外科, 北京,1000486.海军总医院泌尿外科, 北京,1000487.海军总医院泌尿外科, 北京,1000488.海军总医院泌尿外科, 北京,1000489.海军总医院泌尿外科, 北京,10004810.海军总医院泌尿外科, 北京,10004811.海军总医院泌尿外科, 北京,100048
摘要：目的 研究干扰Ras同源物基因家族成员B(Ras homolog gene family member B,RhoB)表达后对肾透明细胞癌(renal clear cell carcinoma,RCCC)细胞生长及迁移能力的影响.方法 检测RhoB在RCCC细胞中的蛋白表达水平,采用脂质体转染方法转染RhoB真核表达载体pcDNA3.0-Flag-RhoB和沉默RhoB的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)即si-RhoB序列及相应空载体和对照序列,应用Western Blot法检测转染后RhoB的蛋白表达情况,通过3-(4,5-二甲基吡啶-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,MTS]法、平板克隆和Transwell小室细胞迁移实验检测细胞生长和细胞迁移能力的变化.结果 RhoB在RCCC细胞中表达降低.与转染空载体组比较,转染pcDNA3.0-Flag-RhoB重组质粒组RhoB的蛋白表达水平明显上调;与转染对照组比较,si-RhoB转染组RhoB的蛋白表达水平明显下调.在RCCC细胞786-O和Caki-1中,上调RhoB的表达后,在4、5、6 d经MTS法测定光密度值明显降低(P<0.05);在786-O细胞中上调RhoB表达后细胞克隆数明显减少;转染48 h后Transwell细胞迁移数明显减少(P<0.05).而下调RhoB表达后,细胞生长和Transwell细胞迁移数没有明显变化.在相对高表达RhoB的正常人肾小管上皮细胞中下调RhoB表达后细胞生长和细胞迁移数明显增多.结论 过表达RhoB后明显抑制RCCC细胞生长和迁移能力.
关键词：Ras同源物基因家族成员B肾透明细胞癌细胞生长迁移
分类号：R737.11(泌尿生殖器肿瘤)Q51(蛋白质)
资助基金：海军总医院创新培育基金(CXPY201423)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 80-83,87 )
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