miR-125a下调Notch1参与调控心肌梗死后心肌纤维化
杨泽福1
万建平2
潘伟1
薛世荣1
杨玲1
1.528200,广东 佛山,佛山市南海区人民医院心血管内科2.528200,广东 佛山,佛山市南海区人民医院电生理科
摘要：目的 探究微小RNA-125a(MicroRNA-125a,miR-125a)在心肌梗死(Myocardial Infarction,MI)后心肌纤维化(Myocardial Fibrosis,MF)中的作用及对Notch1及其相关蛋白表达的影响.方法 整理分析120位MI后非MF患者和115位MI后MF患者一般临床资料及心电图特征;Masson染色观察各心脏重构病变;光学比色法检测羟脯氨酸含量;免疫荧光和免疫组化技术检测MI后MF病变组织α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth Muscle Actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链反应(Quantitative Real Time-Poly-merase Chain Reaction,qRT-PCR)法检测患者组织与外周血miR-125a含量;qRT-PCR和Western Blot检测miR-125a抑制剂对人原代心脏成纤维细胞miR-125a和Notch1表达的影响;细胞计数盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)法检测人原代心脏成纤维细胞增殖率;AnnexinⅤ/碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)双标法和DAPI染色法检测细胞凋亡;Western Blot检测Notch1、p-Smad2/3、Smad2/3、α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达.结果 MI后MF患者与MI后非MF患者相比,外周血和组织中miR-125a含量显著升高;显著升高的miR-125a含量与左心室收缩压、收缩末期容积、舒张末期容积、射血分数、羟脯氨酸、α-SMA和Ⅰ型胶原含量显著正相关,与左心室舒张压呈显著负相关;miR-125a抑制剂可剂量依赖性(20～100μmol/L)上调Notch1蛋白表达;40μmol/L的miR-125a抑制剂可时间依赖性(24～72 h)抑制细胞增殖;40μmol/L的miR-125a抑制剂组细胞在24 h时核固缩和AnnexinⅤ+PI-细胞比例明显高于40μmol/L miR-NC的对照组水平;40μmol/L的miR-125a抑制剂可显著上调转化生长因子-β1介导的Notch1蛋白的下调,p-Smad2/3、α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白的上调.结论 高表达的miR-125a与MI后MF心功能显著相关,且其下调通过上调Notch1蛋白并抑制p-Smad2/3引起心脏成纤维细胞凋亡并抑制细胞增殖.
关键词：心肌梗死后心脏纤维化微小RNA-125a心脏成纤维细胞细胞增殖和凋亡
分类号：R542.2(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：佛山市医学类科技攻关计划(2015AB000052)
论文发表日期：2021-02-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 15-20,25 )
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