树突状细胞酸敏感离子通道蛋白基因表达研究
杨琴
严笑
谭政
1.华中科技大学同济医学院,湖北,武汉,4300002.华中科技大学同济医学院,湖北,武汉,4300003.华中科技大学同济医学院,湖北,武汉,430000
摘要：目的 检测DC细胞上是否有酸敏感离子通道(ASICs)基因表达,为之后DC细胞与ASICs关系及酸性微环境影响DC细胞功能的分子路径等研究奠定基础.方法 提取DC2.4细胞的总RNA并逆转录为cDNA,以小鼠海马组织作为阳性对照,GAPDH作为内参,用针对ASIC1保守序列的引物(含限制性内切酶的酶切位点)进行PCR检测,选取ASIC1相应条带,用DpnⅠ酶切,连接到T19载体上,转染至DH5ɑ细菌中,在含有氨苄青霉素的培养基中扩增,小量提取单克隆菌群的质粒,再次用DpnⅠ酶切,将酶切产物与DC2.4细胞的PCR产物分别电泳,选择有与DC2.4细胞相同条带的菌群进行测序,并利用BLAST对测序结果与NCBI中搜索的ASIC序列进行比对.结果 RT-PCR检测发现DC2.4存在与ASIC1对应mRNA相同长度的条带;测序结果证实其为ASIC1对应的mRNA序列.结论 DC2.4细胞上有ASIC1对应mRNA的表达,ASIC1可能在酸性微环境影响DC细胞功能的途径中发挥作用.
关键词：树突状细胞酸敏感离子通道酸性微环境
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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