高纯度神经胶质瘤干细胞的分离与鉴定
李侠
秦军
1.湖北省十堰市太和医院/湖北医药学院附属太和医院,湖北十堰,4420002.湖北省十堰市太和医院/湖北医药学院附属太和医院,湖北十堰,442000
摘要:目的 从人脑神经胶质瘤组织中培养鉴定并分离提取高纯度的神经胶质瘤干细胞,观察神经胶质瘤干细胞的生长活性,为神经胶质瘤的治疗提供新的途径.方法 取术中的胶质瘤组织制成单细胞悬液,加入合有神经生长因子和双抗的无血清DMEM/F12培养液中培养、传代,进行免疫荧光染色检测,应用染色体核型检查及分析神经胶质瘤干细胞.最后用流式细胞仪检测经免疫磁珠分选系统分离提取的CD133+神经胶质瘤干细胞的纯度.结果 ①培养出神经胶质瘤干细胞,传代后仍能很快形成细胞球样结构,且形态与原代大致相同.②悬浮的细胞免疫荧光染色检测结果显示Nestin、CD133染色阳性,而培养皿底部贴壁的细胞Nestin、CD133染色均呈现阴性.③染色体核型检查结果显示胶质瘤干细胞球的细胞核染色体均为非整倍体,即异倍体,且其中有部分染色体呈现断裂现象,染色体上存在部分基因片段的缺失.染色体核型分析结果为:45XY,-10,del(5) (p15),del(16) (p;q).④免疫磁珠分选系统分离出的CD133+神经胶质瘤干细胞经过流式细胞仪测得纯度为(86.83士5.12)%.结论 经过免疫荧光染色和染色体核型检查及分析最终鉴定为人脑神经胶质瘤干细胞,并且诱导分化成功,成功分离出高纯度的CD133+神经胶质瘤干细胞.
关键词:神经胶质瘤干细胞分离鉴定生长活性纯度
分类号:R739.4(神经系肿瘤)
论文发表日期:2018-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 3449-3452 )
