TLR4介导小鼠小胶质细胞自噬在脑出血后炎症反应的作用机制研究
陆梦茹
朱祖福
张慧萍
孔玉
高志强
杨江胜
陆强彬
柏燕燕
周国庆
沈丽萍
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摘要：目的 研究TLR4介导小胶质细胞自噬在脑出血后炎症反应的作用机制.方法 从C57BL/6J小鼠中提取分离原代小胶质细胞,分组1中,A组:小胶质细胞;B组:小胶质细胞+阴性siRNA转染;应用C组:小胶质细胞+TLR4-siRNA转染.应用Q-PCR和Western Blot检测分组1中TLR4的表达.分组2中,D组:小胶质细胞+等量的对照溶剂(0.9％ NaCl);E组:小胶质细胞+自噬抑制剂(3-MA);F组:小胶质细胞+control-siRNA+ 3-MA;G组:小胶质细胞+TLR4-siRNA+等量的对照溶剂(0.9％ NaCl);H组:小胶质细胞+TLR4-siRNA+3-MA.Western Blot检测LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、TLR4、MyD88和核转录因子(NF-κcB)蛋白表达.ELISA检测细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平.结果 ①A组和B组TLR4mRNA和蛋白表达水平无明显变化(P＞0.05);与B组相比,C组TLR4 mRNA和蛋白表达水平下调(P＜0.05).②D组、E组和F组TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白水平无明显变化(P＞0.05);与D组相比,G组TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白水平下调(P＜0.05);与F组相比,H组TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白水平下调(P＜0.05).E组和F组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、TNF-α、IL-1β、IL-6水平无明显变化(P＞0.05);与F组相比,H组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、TNF-α、IL-1β、IL-6水平下降(P＜0.05);与G组相比,H组LC3-M比值、TNF-α、IL-1β、IL-6水平下降(P＜0.05).结论 TLR4-siRNA可抑制TLR4介导的小胶质细胞自噬,从而减轻自噬引起的脑出血炎症损伤.
关键词：脑出血TLR4小胶质细胞自噬核转录因子肿瘤坏死因子-α白细胞介素-1β白细胞介素-6
分类号：R743(神经病学与精神病学)R255.2(中医内科学)
资助基金：江阴科技局指令性计划项目(No.JYKJ3033)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 689-693 )
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