p300/CBP相关因子对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及机制研究
徐昌武
邱立强
夏豪
江洪
1.武汉大学人民医院心血管内科,心血管病湖北省重点实验室,武汉大学心血管病研究所 武汉 4300602.武汉大学人民医院心血管内科,心血管病湖北省重点实验室,武汉大学心血管病研究所 武汉 4300603.武汉大学人民医院心血管内科,心血管病湖北省重点实验室,武汉大学心血管病研究所 武汉 4300604.武汉大学人民医院心血管内科,心血管病湖北省重点实验室,武汉大学心血管病研究所 武汉 430060
摘要：目的 探讨p300/CBP相关因子(PCAF)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用及机制.方法 组织块贴壁法获取大鼠原代VSMCs,使用Ad-PCAF RNAi腺病毒转染VSMCs抑制PCAF表达.选择1μg/mL的脂多糖(LPS)作为VSMCs增殖诱导剂.将实验分为6组:对照组(A组)、对照组+1μg/mL脂多糖刺激组(B组)、Ad-GFP腺病毒转染组(C组)、Ad-GFP腺病毒转染+1μg/mL脂多糖刺激组(D组)、Ad-PCAF RNAi腺病毒转染组(E组)、Ad-PCAF RNAi腺病毒转染+1μg/mL脂多糖刺激组(F组),使用CCK-8和流式细胞周期检测细胞增殖情况,各组中PCAF表达采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测,蛋白免疫印迹法检测各组丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38 MAPK)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)表达水平.结果 1μg/mL脂多糖明显促进VSMCs增殖;同时,下调PCAF表达后,VSMCs增殖活性明显降低(P<0.05).流式细胞周期检测结果显示,脂多糖可促进VSMCs由S期向G2期转化,而下调PCAF后可明显抑制脂多糖的作用(P<0.05).同时,脂多糖诱导后VSMCs中PCAF mRNA表达水平明显增强;转染Ad-PCAF RNAi腺病毒后可明显降低VSMCs内PCAF mRNA的表达水平(P<0.05).此外,脂多糖诱导后VSMCs中p-p38 MAPK、p-AKT表达水平均明显升高(P<0.05);而下调PCAF表达后,p-p38 MAPK、p-AKT表达均明显降低(P<0.05).结论 下调PCAF的表达对VSMCs增殖具有明显的抑制作用,其机制可能与抑制细胞内p-p38 MAPK、p-AKT表达有关.
关键词：p300/CBP相关因子血管平滑肌细胞增殖脂多糖丝裂原活化蛋白激酶p38
分类号：R329(人体形态学)
资助基金：国家自然科学基金(No.81500228)
论文发表日期：2020-09-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 2777-2782 )
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