丹参酮ⅡA调控Sirt1通路影响巨噬细胞极化的机制研究
宋璐霞1
张杰1
马丹2
樊懿萱1
刘启予1
赵麟1
徐浩3
1.北京中医药大学研究生院,北京 1000292.中国中医科学院西苑医院,北京 1000913.中国中医科学院西苑医院,北京 100091;中国中医科学院西苑医院国家中医心血管病临床医学研究中心,北京 100091
摘要：目的 基于Sirt1通路探讨丹参酮ⅡA对巨噬细胞极化的影响及其分子机制.方法 实验分为空白组(正常培养的RAW264.7细胞)、模型组[100 ng/mL脂多糖(LPS)处理24 h]、Sirt1敲降组(LPS+Sirt1 RNA干扰)、丹参酮ⅡA组(丹参酮ⅡA+LPS)及Sirt1敲降+丹参酮组(丹参酮ⅡA+LPS+Sirt1 RNA干扰),各组培养24 h后进行后续实验.CCK8法检测丹参酮ⅡA浓度为5μg/mL、10μg/mL和20μg/mL时RAW 264.7细胞存活率选取最佳干预浓度;流式细胞术检测各组M1、M2型巨噬细胞分布情况;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测Sirt1通路关键蛋白表达;实时定量聚合酶链式反应(qPCR)检测Sirt1通路相关靶点mRNA表达.结果 丹参酮ⅡA能明显抑制LPS诱导的RAW 264.7炎症模型中M1型巨噬细胞增殖(P<0.001),并诱导M2型巨噬细胞增殖(P<0.001);敲降Sirt1基因后,M1型巨噬细胞明显增多(P<0.001),M2型巨噬细胞数下降,但差异无统计学意义(P>0.05);Western Blot结果显示:与模型组比较,丹参酮ⅡA能明显上调Sirt1、Arg1蛋白表达(P<0.01),减少NF-κB及iNOS表达(P<0.05或P<0.01),Sirt1敲降组中炎症相关因子表达升高,Sirt1、PPAR-γ表达减少.与模型组比较,丹参酮ⅡA上调Sirt1、PPAR-γ、Arg1 mRNA表达(P<0.05或P<0.01),抑制NF-κB、iNOS mRNA表达(P<0.01或P<0.01),Sirt1敲降组中Sirt1、PPAR-γ表达减少,NF-κB、iNOS、Arg1表达水平升高.结论 丹参酮ⅡA能够通过激活Sirt1通路调控巨噬细胞M1型向M2型转化,从而抑制炎症反应发生,发挥稳定动脉粥样硬化斑块作用.
关键词：动脉粥样硬化丹参酮ⅡA炎症巨噬细胞极化Sirt1
资助基金：国家自然科学基金(No.82074215)
论文发表日期：2022-04-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1210-1216 )
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