miR-19a-3p靶向上调SOCS3参与急性川崎病病理发展的机制研究
郑瑞利
杨慧敏
冯迎军
吕爱婷
王芳洁
郑州大学附属儿童医院 郑州 450018
摘要：目的:探讨微小RNA-19a-3p(miR-19a-3p)/细胞因子信号抑制物3(SOCS3)信号轴在川崎病(KD)病理发展过程中的调控机制.方法:采集我院川崎病患儿、川崎病治疗后患儿血清,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白质印迹(Western Blot)法检测miR-19a-3p、SOCS3 mRNA及蛋白表达变化.小鼠腹腔注射白色念珠菌水溶物(CAWS)建立川崎病模型,分为正常对照组、模型组、si-miR-19a-3p组、ad-SOCS3组、si-NC组、ad-NC组,每组10只.取小鼠冠状动脉组织,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、血管内皮素(ET)水平;苏木素-伊红(HE)染色法观察冠状动脉病理变化;免疫组化法检测SOCS3阳性表达水平;RT-qPCR及Western Blot法检测miR-19a-3p、SOCS3 mRNA及蛋白表达变化;Western Blot法检测Janus酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)、核转录因子-κB(NF-κB)、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)蛋白表达水平.取人冠状动脉内皮细胞(HCAEC),用川崎病患儿血清培养HCAEC以模拟体外川崎病模型,并分为正常对照组、川崎病组、si-miR-19a-3p组、si-SOCS3组、si-miR-19a-3p+si-SOCS3组、si-NC-1组、si-NC-2组;ELISA法检测细胞上清液炎性因子TNF-α、IL-1β水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;管腔形成试验检测管腔形成情况;RT-qPCR法及Western Blot法检测miR-19a-3p、SOCS3 mRNA及蛋白表达变化.结果:川崎病患儿血清中miR-19a-3p表达升高,SOCS3 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05);随着川崎病患儿康复,miR-19a-3p、SOCS3 mRNA及蛋白表达均趋于正常.沉默miR-19a-3p及上调SOCS3表达后,川崎病小鼠死亡减少,冠状动脉血管损伤缓解,SOCS3介导的炎性通路相关蛋白表达降低(P<0.05).下调SOCS3表达可逆转miR-19a-3p沉默发挥抑制HCAEC凋亡、管腔形成、炎性因子分泌等作用(P<0.05).结论:miR-19a-3p高表达、SOCS3低表达可能参与川崎病血管炎性损伤过程,沉默miR-19a-3p可靶向上调SOCS3表达,抑制炎症反应,减轻川崎病冠状动脉血管损伤.
关键词：川崎病微小RNA-19a-3p细胞因子信号抑制物3炎性损伤实验研究
资助基金：河南省医学科技攻关计划联合共建立项项目(LHGJ20200647)
论文发表日期：2023-03-16
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 1047-1055 )
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